Пандемия ковида длится уже больше года. Теперь, стоит кому-нибудь кашлянуть, и мы сразу подозреваем коронавирусную болезнь, никаких больше «просто простыл». И на это есть основания: грипп и другие привычные респираторные болезни в 2020 году будто бы отступили. Они что, тоже пострадали от пандемии ковида?
Простуды и грипп — сезонные болезни: осенью и зимой мы болеем ими чаще, чем летом. Но эпидемический сезон 2020-2021 выдался особенным.
В Северном полушарии сезон гриппа начинается в районе октября и может длиться до апреля или мая. Но по данным ВОЗ, на конец 2020 года на нашем конце земного шара активность гриппа находилась на таком же низком уровне, как и летом. То есть сезон простуд будто бы не начался.
По данным американского Центра по контролю и предотвращению заболеваний (CDC), в этом сезоне с жалобами, похожими на грипп, в больницы США обратилось гораздо меньше людей, чем в прошлом. На графике хорошо видно, что в сезон 2020-2021 заболеваемость гриппом упала до 0,9 процентов населения страны — это гораздо ниже базового уровня в 2,6 процентов, рассчитанного за семь сезонов подряд. Такого не было десять лет.
Процент похожих на грипп заболеваний, зарегистрированных в разные сезоны. Базовый уровень заболеваемости гриппом обозначен горизонтальной пунктирной линией, а сезон 2020-2021 — красными треугольниками
CDC
В Южном полушарии сезон гриппа начинается в апреле и длится до сентября. Но и здесь в 2020 году было то же самое: заболеваемость гриппом снизилась во всех трех странах, где ведется мониторинг — в Австралии, Чили и в ЮАР.
В апреле-июле 2020 года в Австралии только 33 из 60 031 тестов на грипп оказались положительными. В Чили — 12 из 21 178, а в ЮАР — 6 из 2098. Всего 51 положительный образец из 83 307 на три страны — это 0,06 процента. Для сравнения, в предыдущие четыре года в эти же месяцы положительными оказались 24 512 из 178 690 образцов, то есть 13 процентов.
Процент положительных результатов тестов на грипп к общему числу тестов за четыре года: с 2017 по 2020. Сплошной синей линией обозначен 2020 год
CDC
Других вирусных болезней в зимний сезон 2020-2021 годов тоже стало меньше. По сравнению с предыдущим годом, передача простудного респираторно-синцитиального вируса (RSV) в США снизилась как минимум на 20 процентов. А вспышки редкого и очень тяжелого заболевания позвоночника, напоминающего полиомиелит — острого вялого миелита — и вовсе не было, хотя она случается каждые два года и должна была вернуться в США в 2020 году.
Кто кого заборет
Когда вы заболеваете «очередной простудой», врач, как правило, может поставить диагноз: это или ОРВИ, или грипп, или ковид (который, строго говоря, тоже ОРВИ, но пока что у нас на особом счету). Эти болезни имеют схожую природу и атакуют нас примерно одинаково — передаются воздушно-капельным путем, инфицируют клетки дыхательных путей, пробираются в легкие. А это значит, что между ними идет самая настоящая конкуренция за «кормовую базу» — нас с вами.
При этом разные простудные вирусы взаимодействуют друг с другом по-разному. То, будут вирусы «бороться» друг с другом до победного конца, или попытаются ужиться в одном организме, зависит от множества причин.
Скорость размножения вируса. У нас есть данные, что при одновременном заражении в борьбе за клетки, как правило, побеждает тот вирус, который быстрее размножается. «Быстрый» вирус эффективнее захватывает клетки, так что его «медленному» сопернику просто не хватает ресурсов для успешного размножения. В результате быстрый вирус подавляет размножение более медленного.
Порядок проникновения в организм. Если один вирус начинает размножаться в клетках до появления другого, он получает беспрепятственный доступ ко всем клеткам-мишеням — то есть оказывается в лучших условиях и получает преимущество перед тем, кто придет следом. Исследователи установили, что первоначальная риновирусная инфекция может блокировать последующую инфекцию респираторно-синцитиальным вирусом. Это работает и наоборот: если человек сначала заражается респираторно-синцитиальным вирусом, тот подавит более позднюю риновирусную инфекцию.
Количество вирусных частиц, которые попали в организм. Если разные вирусы попали в организм одновременно, преимущество получает тот вирус, в «порции» которого было больше частиц. Большое количество вирусных «солдат» позволяет быстрее захватить больше клеток и получить преимущество перед конкурентом.
Время проникновения в клетку. В одну и ту же клетку способны внедриться два разных вируса. Но то, станет ли вирус-«пришелец» подавлять размножение вируса-«туземца», зависит от того, через какое время «пришелец» попадает в клетку. Исследование показало, что, если вирус гриппа А проникал в клетку одновременно с респираторно-синцитиальным вирусом, то он блокировал размножение последнего. А если вирус гриппа попадал в клетку через 12 часов после того, как там уже устроился респираторно-синцитиальный вирус, то грипп уже не мог повлиять на его рост.
Как меняется титр различных вирусных инфекций в зависимости от того, в одиночестве они захватывают клетки организма или в паре с каким-то еще патогеном. Вирусы: парагрипп (PIV), респираторно-синцитиальный вирус (RSV), риновирус (hRV), метапневмовирус (hMPV), вирус гриппа А (IAV)
Lubna Pinky, Hana M. Dobrovolny / PLOS / CC BY-SA 4.0
Однако при определенных условиях разные вирусы могут уживаться друг с другом. Один и тот же пациент может заразиться и гриппом, и ОРВИ. Более того — разные вирусы могут размножаться в одной клетке. Совместное заражение разными, даже неродственными вирусами может привести к тому, что они не только «подружатся», но и обменяются генетическим материалом — так что в результате получатся химерные вирусы.
Поскольку факторов, воздействующих на поведение вирусов, очень много, предсказать, чем окончится битва коронавируса с гриппом и простудными вирусами, очень тяжело. О том, как коронавирус SARS-CoV-2 взаимодействует с конкурентами, мы пока знаем очень мало.
Например, пока не понятно, может ли коронавирус сосуществовать с вирусом гриппа в одной клетке. В принципе, это возможно. И грипп, и коронавирус используют для проникновения в клетку разные рецепторы, так что конкуренции в этом вопросе между ними быть не должно. Кроме того, клетки альвеол II типа, которые предпочитает SARS-CoV-2, являются основным местом репликации вируса гриппа А. Но означает ли это, что при совместной инфекции оба вируса занимают именно эти клетки, мы пока не знаем.
Тем не менее, кое-какие предварительные выводы сделать все-таки можно. Хотя случаи совместного заражения одного человека коронавирусом и другими вирусами действительно известны, они встречаются реже, чем случаи совместного заражения другими респираторными вирусами. Это может значить, что либо SARS-CoV-2 подавляет размножение большинства других респираторных вирусов, либо размножение SARS-CoV-2 подавляется присутствием других вирусов.
Существуют модели, которые оценивают, у какого вируса выше шанс победить — у коронавируса, гриппа или одного из многочисленных возбудителей ОРВИ. Главный фактор, от которого зависит победа — скорость размножения вируса в клетке. Согласно формуле, которая применялась для расчета скорости размножения предыдущих вирусных инфекций, скорость роста SARS-CoV-2 меньше, чем у других респираторных вирусов. Это значит, что и грипп, и многие другие патогены должны его побеждать.
Коинфекция новым коронавирусом и: гриппом (верхний левый угол); респираторно-синцитиальным вирусом (верхний правый угол); риновирусом (слева в центре); парагриппом (справа в центре); метапневмовирусом (внизу). Штрихпунктриная линия — изменение титра при инфекции только одним вирусом, сплошные показывают динамику при коинфекции. Черный пунктир — граница детекции титра
Lubna Pinky Hana M. Dobrovolny / Journal of Medical Virology, 2020
У коронавируса появляется шанс на совместное заражение, только если он попадет в клетку за 5 дней до вируса гриппа. А вытеснить конкурента он сможет, только если другой вирус попытается вторгнуться в организм спустя 10 дней с момента заражения коронавирусом.
Интересно, что даже когда доза вирусных частиц SARS-CoV-2 была в 106 раз больше количества вирусных частиц конкурента, при одновременном заражении это не помогло коронавирусу одержать убедительную победу над большинством вирусных конкурентов. Хотя коронавирусная нагрузка может оставаться высокой еще довольно долго, при совместном заражении в таких условиях SARS-CoV-2 практически не размножается.
Моделирование ситуаций, в которых «стартовая доза» SARS-CoV-2 была в 100 раз больше (сплошная линия), в 104 больше (пунктир), 106 (штрихпунктир), чем число вирусных частиц его конкурента. IAV — грипп, RSV — респираторно-синцитиальный вирус, HRV — риновирус, PIV — парагрипп, HMPV — метапневмовирус
Lubna Pinky Hana M. Dobrovolny / Journal of Medical Virology, 2020
Судя по некоторым данным, редкий случай «сожительства» коронавируса и гриппа может дорого обойтись пациенту. У человека, в организме которого поселяются оба вируса, риск умереть возрастает в шесть раз, и в два раза — по сравнению с теми, кто заразился только коронавирусной инфекцией.
Итак — в масштабе отдельно взятого организма грипп, в теории, имеет преимущество перед коронавирусом. Куда же тогда подевался сезон гриппа?
Честной войны не бывает
Для оценки заразности болезни эпидемиологи используют метрику R0 — это среднее количество непривитых людей без иммунитета, которые могут подхватить болезнь от одного больного человека. Если R0>1, каждый больной заражает более одного человека. Когда R0=1, эпидемия достигает пика, а когда R0<1 — идет на спад. Подробнее об этом можно прочитать в статье «Пандемия по графику».
У сезонных инфекций R0 сильно зависит от поведения людей. Когда на улице становится холодно, туристы и дачники возвращаются из отпусков на работу, а дети — в школу. То есть люди собираются в тесных помещениях, где так легко обмениваться вирусами. Именно поэтому простудой и гриппом мы чаще всего болеем зимой. Поэтому один из наиболее эффективных способов остановить эпидемию (помимо вакцинации) — изолировать людей друг от друга.
Коронавирусная инфекция, грипп и ОРВИ передаются от человека к человеку при чихании и кашле, поэтому лучше всего распространяются при тесном контакте. R0 у гриппа и ОРВИ одинаков — в пределах 1,4-1,6, а у коронавирусной болезни, по разным оценкам — в среднем 2,63 (от 0,4 до 4,6). Это выше, чем у сезонных инфекций. Логично, что меры, направленные на предотвращение передачи коронавирусной болезни — запреты на международные авиаперелеты, локдаун, маски и социальное дистанцирование — заодно предотвратили и передачу сезонных инфекций.
В этом конфликте есть еще один участник — популяционный иммунитет. Вирусы гриппа и многие вирусы ОРВИ — наши старые враги, от которых иммунные системы большинства людей учились защищаться всю жизнь. А коронавирус — «молодая» инфекция, иммунитет от которой только недавно стал появляться у привитых и переболевших. Поэтому у коронавируса все еще есть преимущество, которое гриппу просто недоступно.
Российский грипп
В России сезон гриппа наступает в октябре и длится до конца мая. 29 марта 2020 года в стране начался «отпускной режим», на следующий день были полностью закрыты границы. Режим «всероссийской самоизоляции» продлился шесть недель, дальше решение о снятии или продлении ограничений принимали уже федеральные власти.
Данные о заболеваемости гриппом в России собирает и публикует Институт гриппа имени Смородинцева, при этом проводя выборочную диагностику вируса методом ПЦР в разных городах страны.
По данным института, с октября по декабрь 2019 года эпидемический сезон проходил довольно типично — заболеваемость была на несколько процентов ниже базовой линии в 72,2 человека на 10 000 населения. На 29 марта, то есть на 13 неделю, когда ввели всеобщий режим самоизоляции, заболеваемость превышала базовую линию на 1,9 процентов.
Уже на следующую, 14 неделю 2020 года заболеваемость упала ниже базовой — сразу на 17,9 процентов. К концу 19 недели, первой недели мая, заболеваемость была рекордно низкой — всего 20,2 человека на 10 000 населения, это ниже базовой линии на 72 процента. Это вполне разумно списать на эффект коронавирусных ограничений.
Тем более что с их отменой, хотя это и произошло на самом излете сезона гриппа, заболеваемость стала понемногу расти — на 20 неделю составила 20,8 человек на 10 тысяч, на 21 неделю — 21,2 человека, а к концу мая 21,3 человека. Июнь, июль и август в России — уже не сезон гриппа, поэтому мониторинга не велось.
Заболеваемость гриппом в России в 2019, 2020 и 2021 годах. Падение на «стыке» годов имеет сугубо социальную природу: в праздники люди реже обращаются за медицинской помощью при симптомах простуды
Источник: influenza.spb.ru
Он возобновился с 37 недели, то есть с середины сентября. В это время заболеваемость была ниже базовой линии на 25,5 процентов и составляла 53,9 человек на 10 000 населения. С 38 недели она стала понемногу расти, и к 41 неделе, то есть к середине октября, практически достигла базового уровня — 70,1 человек на 10 000 населения. Иными словами, сезон простуд начался по расписанию.
Массовой самоизоляции зимой 2020-2021 года в России уже не было. Тем не менее, на 10 неделю 2021 года заболеваемость гриппом и ОРВИ остается сравнительно невысокой — 60,9 человек на 10 000 населения, что на 13 процентов ниже базовой линии. При этом в отношении гриппа ситуация во всем подобна тому, что происходило в Австралии и ЮАР летом 2020-го: если сравнивать отчеты о лабораторной диагностике гриппа за 2021 и 2020 год, то больше всего положительных ПЦР-тестов на вирус гриппа в 2021 году было зарегистрировано на 9-й неделе — их целых 7 на 3320 проб, в то время как год назад в ту же самую неделю «гриппозными» были 1612 проб из 4826. Поэтому если о «сезоне простуд» в России еще можно говорить, то вот сезона гриппа, судя по всему, не случилось.
Они возвращаются
Сезонный пик заболеваемости в Австралии приходится приблизительно на середину июля, а сам сезон простуд длится с января по август. В 2020 году это время пришлось на активные противоэпидемические мероприятия — уже 20 марта австралийские границы были закрыты, а локдаун длился с 29 марта по 27 апреля. 29 апреля дети вернулись в школу, но правила социального дистанцирования и масочный режим там соблюдают до сих пор.
В первые 13 недель 2020 года, до введения ограничений, число выявленных случаев простуды и гриппа было таким же, как и в предыдущие сезоны: 29 случаев простуды и 24 случая гриппа в день. А следующие 21 недель волна сезонных болезней, вместо того чтобы нарастать, куда-то пропала: было выявлено 10 случаев RSV и 1 случай гриппа. По сравнению со средними показателями до пандемии, количество выявленных ОРВИ упало на 98 процента, а гриппа — на 99,4 процента.
На рисунке А изображены кривые заболеваемости простудой, на рисунке В — гриппа в Австралии. Черная линия — базовый уровень заболеваемости (2012-2019 годы), красная и синяя — динамика случаев простуды и гриппа после введения ограничений
Daniel K Yeoh et al. / Clinical Infectious Diseases, 2020
Но после того, как локдаун ослабили, дети вернулись в школу, а австралийский сезон простуд должен был закончиться, число случаев простуды резко пошло вверх (о гриппе данных пока нет). В конце декабря, то есть в «простудное межсезонье» для Австралии, число случаев в 2,6 раза превысило сезонный пик заболеваемости, который в норме приходится на июнь.
Но почему пик оказался таким высоким? Возможно, дело именно в «пропущенном» сезоне простуд. Поскольку сидевшие в карантине люди не встречались ни с какими респираторными вирусами, адаптивный иммунный ответ, который защищает хозяина независимо от наличия антител к конкретному штамму, не тренировался бороться с простудными вирусами (подробнее о том, как работает иммунный ответ, можно прочитать в статье «Мы его запомним?»).
Кривые заболеваемости простудой в Австралии. Черная линия — базовый уровень заболеваемости (2012-2019 годы), красная — динамика начиная с сентября 2020 года. После снятия ограничений заболеваемость резко пошла вверх
Daniel K Yeoh et al. / Clinical Infectious Diseases, 2020
В результате, когда люди вышли с карантина, восприимчивых к простудным вирусам среди них оказалось больше. Подобная ситуация характерна не только для Австралии. После снятия ограничений та же самая картина наблюдалась, например, в Гонконге.
О том, каким будет простудный сезон в этом году, судить пока тяжело. Скорее всего, в Северном полушарии, как и в Южном, сезон простуд сдвинется на несколько месяцев. А еще некоторые эксперты считают, что часть привычных нам гриппозных штаммов может исчезнуть. Но радоваться рано: «массовое вымирание» некоторых вирусных штаммов может открыть дорогу новым, более суровым возбудителям. А если учесть, что за время локдаунов человечество порядком растеряло свой противовирусный иммунитет, есть вероятность, что грядущий сезон простуд будет еще тяжелее предыдущих.
Даниил Давыдов
Гриппная пора: эпидемический порог превышен уже по всей стране
Вирус гриппа распространился уже во всех округах страны. Эпидемический порог в целом по России уже превышен на 5,5%. В нынешнем году циркулирует преимущественно вирус В, для которого характерны медленное распространение и меньшее число больных, однако встречаются штаммы h2N1 и H3N2. Эксперты считают, что показатели заболеваемости и смертности от гриппа занижены, а цифры, касающиеся вакцинации, напротив, завышены. Но отмечают, что ситуация с коронавирусом дисциплинировала россиян, замедлив скорость распространения респираторных инфекций.
Температура повышается
Из-за гриппа регионы один за другим вводят карантин. Вчера, 10 февраля, были закрыты все школы в Миассе, Воронеже и Уфе. Объявленный ранее карантин продлили в Саратове, Тюмени, Оренбурге, Ульяновске, а в Вологодской области ограничили проведение массовых мероприятий.
— Ситуация с гриппом наиболее неблагоприятна в Южном и Северо-Кавказском ФО, — сообщили «Известиям» в Минздраве.
Тенденция увеличения заболеваемости гриппом и ОРВИ отмечена во всех округах страны и во всех возрастных группах, сообщили «Известиям» в НИИ гриппа имени Смородинцева. Там уточнили, что на пятой неделе 2020 года заболеваемость гриппом и ОРВИ превысила эпидемический порог на 5,5%, а предэпидемическую базовую линию — на 17,8%.
Фото: ТАСС/Юрий Смитюк
— По данным лабораторной диагностики, в 51 городе по всей стране в этом году наблюдается широкое распространение гриппа с преобладанием вируса В. Также встречаются штаммы А (h2N1) и в небольшом количестве H3N2. Грипп распространился практически по всей территории страны, — рассказала «Известиям» ведущий научный сотрудник ФГБУ «НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева» Елизавета Смородинцева.
Как правило, в текущем сезоне в страну приходят вирусы, которых не было в прошлые годы, уточнила эксперт. Например, вируса гриппа В штамма «Виктория» долго не было на территории России, а сейчас он пришел. Для вируса группы В характерно более медленное распространение и меньшее число заболевших.
В прошлом году в России преобладали вирусы гриппа типа А, которые чаще вызывают тяжелые формы течения заболевания, отметила Елизавета Смородинцева.
Справка «Известий»
А (h2N1) — вирус, который пришел в Россию в 2009 году и вызвал пандемию. Теперь он считается сезонным. Годы, когда этот вирус преобладал, — 2009, 2010, 2011, а также сезон-2015/16 стали наиболее сложными с точки зрения числа заболевших. Так, например, в 2009 году, по данным НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева, была высокая смертность от гриппа среди беременных женщин.
Страшнее коронавируса
Специалисты сходятся во мнении, что грипп представляет собой куда большую опасность, чем коронавирус. В 2018 году, по данным Роспотребнадзора, от него умерли 127 человек. Для сравнения: годом ранее умерших было в 2,7 раза меньше — 46 человек. Заболеваемость гриппом в 2018-м составила 26,33 на 100 тыс. населения, что на 24,5% ниже заболеваемости 2017 года (тогда было 34,86 на 100 тыс.). Итоги 2019 года ведомство еще не подводило.
— Официальные цифры по летальности от гриппа в России условны, — считает глава Лиги защитников пациентов Александр Саверский. — Достаточно посмотреть на статистику заболеваемости в США, где смертность в разы выше. Человек может умереть от остановки сердца, но до этого у него было воспаление легких, вызванное гриппом.
Как отметил завкафедрой инфекционных болезней РНИМУ имени Пирогова Владимир Никифоров, в США с сентября 2019-го отмечено более 15 млн заболевших гриппом и порядка 10 тыс. умерших от него. А вообще в год от гриппа в США умирают около 40 тыс. человек.
Фото: ИЗВЕСТИЯ/Зураб Джавахадзе
В целом же, по данным ВОЗ, ежегодно от сезонных ОРВИ и гриппа в мире погибают 650 тыс. человек. Большинство из них — в развивающихся странах.
В докладе Роспотребнадзора уточняется, что неблагоприятные исходы обычно обусловлены отсутствием вакцинации от гриппа, наличием у погибших сопутствующих хронических заболеваний (гипертоническая болезнь, ишемическая болезнь сердца, сахарный диабет, ожирение, хронические заболевания органов дыхания). Кроме того, от гриппа можно умереть, если поздно обратиться за медпомощью.
Ситуация с коронавирусом осложняет ситуацию с гриппом не только в России, но и в других странах Северного полушария, поскольку симптомы гриппа, других ОРВИ, а также нового коронавируса совпадают, заявили «Известиям» в Министерстве здравоохранения.
Тем не менее коронавирус стал генеральной репетицией перед началом сезона гриппа, отметил член комитета Госдумы по охране здоровья Борис Менделевич. По его словам, в России удалось предотвратить распространение заболевания именно благодаря предпринятым мерам — изоляции от эпицентра заражения и информационной кампании. Ажиотаж с медицинскими масками пусть и косвенно, но отразился на повышении сознательности россиян, которые лишний раз вспомнили о необходимости соблюдения правил гигиены.
Вечный спор
Специалисты уверены, что наиболее эффективный способ борьбы с гриппом сегодня — вакцинация. В преддверии сезона, по данным Роспотребнадзора, были привиты более 73,95 млн человек (50,5% от численности населения). Перед эпидемическим сезоном 2018-2019 годов против гриппа привили около 70,9 млн человек (49% от численности населения страны).
— Болеют гриппом в основном люди, которые предпочли не делать прививку. У них грипп часто протекает в тяжелой форме, а то и приводит к смерти. Эффективность вакцинирования давно доказана во всем мире, — уверен Владимир Никифоров.
Реальные цифры вакцинации могут отличаться от опубликованных, полагает директор фонда «Здоровье» Эдуард Гаврилов. Так, опрос среди медработников, проведенный фондом пару лет назад, показал, что те уверены в завышении количества вакцинируемых. Опрос ВЦИОМ осенью 2019 года также продемонстрировал, что 58% россиян не планировали в этом году прививку от вируса гриппа. А сомнения в эффективности прививок есть у 23% населения.
Фото: ИЗВЕСТИЯ/Алексей Майшев
— Полезна ли вакцина? Ряд специалистов считают, что бесполезна. Угадать, какой из 2 тыс. существующих штаммов будет опасен, невозможно. Доказательств эффективности прививок нет, — уверен Александр Саверский.
По его словам, сомнения вызывает и определение диагноза, и назначение лечения. Анализ у пациента берут, только если тот попал в инфекционную больницу. В остальных случаях врач обычно на глаз определяет, грипп это или нет. Пока не выявлен возбудитель, о диагнозе говорить нельзя. Но анализ — дело дорогое, когда болеют миллионы, заключил Александр Саверский. Поэтому остается только лечить осложнения.
- Скориченко, «Доисторическая M.» (СПб., 1996); его же, «Гигиена в доисторические времена» (СПб., 1996).
- Wunderlich, «Geschichte der Medicin» (Штуттгардт, 1958).
- Daremberg, «Histoire des sciences médicales» (П., 1966).
- https://nplus1.ru/material/2021/03/24/covid-vs-flu.
- https://iz.ru/974466/ekaterina-iasakova/grippnaia-pora-epidemicheskii-porog-prevyshen-uzhe-po-vsei-strane.
- З.С. Смирнова, Л.М. Борисова, М.П. Киселева и др. Противоопухолевая активность соединения ЛХС-1208 (N-гликозилированные производные индоло[2,3-а]карбазола) // Российский биотерапевтический журнал 2010. № 1. С. 80.
- Moustafine R. I., Bobyleva V. L., Bukhovets A. V., Garipova V. R.,Kabanova T. V., Kemenova V. A., Van den Mooter G. Structural transformations during swelling of polycomplex matrices based on countercharged (meth)acrylate copolymers (Eudragit® EPO/Eudragit® L 100-55). Journal of Pharmaceutical Sciences. 2011; 100:874–885. DOI:10.1002/jps.22320.
